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EdU Click FC-488

Von  baseclick
ROTI®Kit für Flow Cytometry
Icon_Eisstern Die so gekennzeichneten, besonders temperaturempfindlichen Produkte werden in speziellen Kühlboxen auf Kühlakkus oder in Trockeneis verschickt.
Icon_ready-to-use Gebrauchsfertige Produkte und Reagenzien
Wirkungsbeispiele: Sind für Wasserorganismen schädlich, giftig oder sehr giftig, akut oder mit Langzeitwirkung. Sicherheit: Nur im Sondermüll entsorgen, keinesfalls in die Umwelt gelangen lassen.
H411-EUH208
i giftig für Wasserorganismen, mit langfristiger Wirkung
P391
i verschüttete Mengen aufnehmen
Verwandte Produkte
VE
Verp.
Schmelzpunkt (F) 0 °C
Lagertemp.: +4 °C
Transporttemp.: gekühlt
ADR 9 III
WGK 3
UN-Nr. 3077

Kit zum Nachweis der Zellproliferation mittels Durchflusszytometrie. Marker: 6-FAM-Azid Abs. = 496 nm, λEm.= 516 nm)
Für 50 Assays.

Bestandteile

374,50 €/VE 

zzgl. MwSt. | 1 Kit pro VE

Best.-Nr. 7779.1

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ab 6 VE 355,78 €/VE
ab 24 VE 337,05 €/VE
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Produktdetails


  • Äußerst zuverlässig
  • Einfache Handhabung
  • Schnelles Nachweisverfahren (nur 30 Min.)
  • Milde Bedingungen ohne DNA-Denaturierung
  • Modulares System durch Click Chemie
  • Kombinierbar mit vielen Farbstoffen
  • Kompatibel mit Multiplexing
  • keine Zytotoxizität bis zu 1 mM EdU

Die ROTI®kits für Flow Cytometry ermöglichen die Messung der DNA-Synthese in der Durchflusszytometrie. Ähnlich wie bei BrdU-Assays wird bei unserem Assay ein Uracil-Derivat (in diesem Fall Ethinyldesoxyuridin, kurz EdU) in die sich replizierende DNA eingebaut. Zum Nachweis der EdU Moleküle dienen keine Antikörper, stattdessen wird über eine Click-Reaktion direkt ein Fluoreszenzfarbstoff angebunden. Dieser schnelle und elegante Ansatz ermöglicht das direkte Markieren der replizierten DNA mit dem jeweils gewünschten Fluoreszenzfarbstoff, wodurch der Nachweis perfekt an die Mikroskopausstattung angepasst werden kann. Das Protokoll umfasst nur wenige Arbeitsschritte und verringert signifikant die Gesamtarbeitszeit.

Flowcytometry_plot
Abbildung: HeLa-Zellen ohne (A/C) und nach Behandlung mit 10 µM EdU für 2 Stunden (B/D). Die Click-Reaktion wurde unter Verwendung von 6-FAM-Azid durchgeführt.
A: Negativkontrolle; Zellen ohne EdU-Einbau. B: nicht proliferierenden Zellen ohne EdU Einbau (linker Peak in blau) und proliferierende Zellen (S-Phase) mit eingebautem EdU und anschließender Markierung mit 6-FAM-Azid (rechter Peak in grün). Dichte von PI (Propidiumiodid) gefärbten Proben ohne (C) und nach (D) EdU Inkubation und anschließender Click-Reaktion. Die y-Achse stellt die FL1-Fluoreszenz Intensität und die x-Achse den Gehalt an DNA mit FL3-Bereich gemessen dar. Zellzyklus-Phasen sind als G1, S und G2/M Phase bezeichnet.

Die Zahl am Ende des Produktnamens gibt die Wellenlänge an, bei welcher der im Kit enthaltene Fluoreszenzfarbstoff optimal angeregt wird.



Referenzen:

1 N. Dinh Van et al., Modulation of HCV reinfection after orthotopic liver transplantation by fibroblast growth factor-2 and other non-interferon mediators. Gut 2016, 65, 1015-1023.

2 L. Pisarsky et al., Targeting Metabolic Symbiosis to Overcome Resistance to Anti-angiogenic Therapy. Cell Reports 2016, 15, 1-14.


Hinweise zum Kühltransport

Die so gekennzeichneten, besonders temperaturempfindlichen Produkte werden in speziellen Kühlboxen auf Kühlakkus oder in Trockeneis verschickt.
Hierdurch entstehende Mehrkosten werden zusätzlich in Rechnung gestellt (Deutschland: 10,65 Euro, Österreich: 21,30 Euro).

Bitte beachten: Um eine optimale Produktqualität zu gewährleisten, erfolgt der Versand von Kühltransportprodukten innerhalb Deutschlands nur von Mo. bis Mi. und außerhalb Deutschlands nur Mo. und Di.!
Dadurch kann es zu geringen Lieferverzögerungen kommen.



EdU Click FC-488 ROTI®Kit für Flow Cytometry

Technische Informationen
λ 488 nm
Marker 6-FAM 
EdU Click FC-488
Ausgewählte Menge:   0
  1. Zwischensumme:  0.00
Bestell Nr. VE Verp. Preis Menge
7779.1 1 Kit Karton 374,50 €
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Nicht verfügbar
Aktuell kein Liefertermin verfügbar
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Allgemeine Informationen

Verbraucherhinweis:

Die Zahl am Ende des Produktnamens dieser Kits gibt die Wellenlänge an bei welcher der im Kit enthaltene Fluoreszenzfarbstoff angeregt werden kann. Als Anregungsquellen können dabei verschiedene Laser dienen:

  • 488 nm (blau-grüner Argon-Laser 488 nm, blauer Diodenlaser 473 nm)
  • 555 nm (grüner Nd:YAG-Laser 532 nm, grüner Helium-Neon-Laser 543 nm)
  • 594 nm (gelber Helium-Neon-Laser 594 nm, gelber Diodenlaser 594 nm)
  • 647 nm (roter Krypton-Laser 647 nm, roter Helium-Neon-Laser 633 nm, roter Diodenlaser 635 oder 650 nm)

  • Zellproliferationsassays

    Unsere ROTI®Kits für die EdU-vermittelte Detektion der Zellproliferation stellen eine überlegene Alternative für die zeitintensiven und weniger sensitiven BrdU-Assays dar. Ähnlich wie bei BrdU-Assays wird bei unseren Assays ein Uracil-Derivat (in diesem Fall Ethinyldesoxyuridin, kurz EdU) in die sich replizierende DNA eingebaut. Zum Nachweis der EdU Moleküle dienen keine Antikörper, stattdessen wird über eine Click-Reaktion direkt ein Fluoreszenzfarbstoff angebunden. Dieser schnelle und elegante Ansatz ermöglicht das direkte Markieren der replizierten DNA mit dem jeweils gewünschten Fluoreszenzfarbstoff, wodurch der Nachweis perfekt an die Mikroskopausstattung oder Assay-Situation (z.B. bei Doppel- oder Tripelnachweisen) angepasst werden kann. Weiterhin ist die Reaktion hochselektiv, weswegen praktisch keine unspezifische Markierung auftritt. Das Protokoll umfasst nur wenige Arbeitsschritte und verringert signifikant die Gesamtarbeitszeit.


    Für folgende Anwendungen sind Kits erhältlich:

    • Fluoreszenzmikroskopie (ROTI®Kits für Imaging)
    • Durchflusszytometrie (ROTI®Kits für Flow Cytometry)
    • High Throughput Screening(ROTI®Kits für High Throughput Screening)


    Funktionsweise des Click-Assays:

    Schematische Darstellung der Funktionsweise des Click Chemie-basierten Zellproliferationsassays. A) Inkubation von Zellen mit EdU. EdU ist ein Thymidin-Analogon und wird während einer aktiven DNA-Synthese in die DNA eingebaut. B) Nach der DNA-Synthese ist EdU in den Strang integriert. C) Neu-synthetisierte DNA wird durch Markierung mittels einfacher Click Chemie sichtbar gemacht. In diesem Markierungsschritt, der nur 30 Minuten dauert, kann eine Vielzahl verschiedener Fluoreszenzfarbstoff-Azide verwendet werden.


    Vorteile der Click Chemie-basierten Methode:

    • Äußerst zuverlässig
    • Einfache Handhabung
    • Schnelles Nachweisverfahren (nur 30 Min.)
    • Milde Bedingungen ohne DNA-Denaturierung
    • Modulares System durch Click Chemie
    • Kombinierbar mit vielen Farbstoffen
    • Kompatibel mit Multiplexing


    Code im Produktnamen Marker Absorption (nm) Emission (nm) Filterkonfiguration
    -488 6-FAM-Azid 496 516 FITC
    -555 5-TAMRA-Azid 546 579 Sy3™
    -594 5/6 Sulforhodamine 584 603 Texas Red®
    -647 Eterneon-Red (Analog zu Cyanin 5 Azid) 643 662 Sy5™

    Click Chemie

    Die kupfer(I)-katalysierte Azid-Alkin-Cycloaddition (CuAAC) ist das wohl bekannteste Beispiel für eine Gruppe von Reaktionen, die Sharpless als Click-Reaktionen definierte. Diese Click-Reaktionen zeichnen sich besonders durch ihre hohen Ausbeuten, milden Reaktionsbedingungen und durch ihre Toleranz gegenüber einer Vielzahl an funktionellen Gruppen aus.[1-3] In der Regel erfordern derartige Reaktionen eine einfache oder gar keine Aufarbeitung beziehungsweise Reinigung des Produkts. Die wichtigste Eigenschaft der CuAAC ist ihre einzigartige Bioorthogonalität, da in der Regel weder Azid noch Alkin als funktionelle Gruppe in natürlichen Systemen vorkommt.


    Referenzen:
    1 H. C. Kolb, M.G. Finn, K. B. Sharpless, Angew. Chem. Int. Ed. 2001, 40, 2004-2021.
    2 C.W. Tornoe, C. Christensen, M. Meldal, J. Org. Chem. 2002, 67, 3057-3064.
    3 V. V. Rostovtsev, L. G. Green, V. V. Fokin, K. B. Sharpless, Angew. Chem. 2002, 114, 2708-2711; Angew. Chem. Int. Ed. 2002, 41, 2596-2599.


    ROTI®Kits für Flow Cytometry (FC)

    Die ROTI®Kits für Flow Cytometry von Carl ROTH setzen die Click Chemie für den Nachweis der Zellproliferation mittels einer Vielzahl von Fluoreszenzfarbstoff Read-outs ein. Bei diesem Detektionsverfahren sind sowohl die Gesamtzahl der Schritte, als auch die Verarbeitungszeit deutlich reduziert. Das einfach anzuwendende Click Chemie-basierte Nachweisverfahren ist innerhalb von 30 Minuten abgeschlossen.


    Referenzen:
    1 N. Dinh Van et al., Modulation of HCV reinfection after orthotopic liver transplantation by fibroblast growth factor-2 and other non-interferon mediators. Gut 2016, 65, 1015-1023.
    2 L. Pisarsky et al., Targeting Metabolic Symbiosis to Overcome Resistance to Anti-angiogenic Therapy. Cell Reports 2016, 15, 1-14.


    Analysenzertifikate

    Hier können Sie Ihr Analysezertifikat zum ausgewählten Produkt suchen und downloaden. Bitte geben Sie Ihre Chargennummer an.
    Es wurden die folgenden Analysezertifikate gefunden:

    Bestandteile

    EdU10 mg  
    6-FAM-Azide (10 mM in DMSO)130 µl  
    DMSO5 ml  
    Fixative Solution5 ml  
    Saponin Reagent50 ml  
    Catalyst Solution2 ml  
    Buffer Additive400 mg  

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